傳統(tǒng)的菠蘿繁殖方法繁殖系數(shù)低、種苗一致性差、容易攜帶母體的病蟲害，而利用組織培養(yǎng)技術(shù)則可以獲得大量脫毒且生產(chǎn)性狀一致的種苗，滿足生產(chǎn)需求，為進(jìn)行品種的改良和更換提供技術(shù)支撐，可以有效避免體細(xì)胞無(wú)性系發(fā)生變異，降低組織培養(yǎng)成本，有利于菠蘿工廠化育苗和品種的更新?lián)Q代，加快菠蘿產(chǎn)業(yè)化發(fā)展進(jìn)程，接下來(lái)小編將具體說說巴厘菠蘿組織培養(yǎng)技術(shù)。

1 巴厘菠蘿組織培養(yǎng)技術(shù)

1.1 取材及消毒

1.1.1 取材

選擇生長(zhǎng)健壯、無(wú)病蟲害的巴厘品種的吸芽或腋芽。

1.1.2 消毒

在晴天才采摘生長(zhǎng)健壯的吸芽或腋芽，從基部開始剝除衰老葉片后用自來(lái)水將芽沖洗干凈，在吸芽生長(zhǎng)點(diǎn)上方約5cm的地方切斷所有葉片，將芽和著生在吸芽上的白色葉基放入次氯酸鈉中消毒十分鐘后用無(wú)菌水沖洗三次，之后再放入0.1%氯化汞中消毒吧分鐘后用無(wú)菌室沖洗三次即可。

1.2 組織培養(yǎng)

1.2.1 直接再生途徑

用滅好菌的手術(shù)刀將消毒好的外植體縱切成2-3塊，接種于MS＋2mg/L 6-BA＋2.5mg/L NAA的固體培養(yǎng)基上進(jìn)行啟動(dòng)培養(yǎng)。在培養(yǎng)20-30天后就會(huì)從葉腋處萌發(fā)出不定芽。將不定芽從基部切下轉(zhuǎn)接于MS＋2mg/L 6-BA＋1mg/L NAA培養(yǎng)基上進(jìn)行繼代增殖，繼代時(shí)間為25-30天，增殖系數(shù)約為3。

1.2.2 愈傷組織、芽的誘導(dǎo)和增殖

a、菠蘿品種巴厘吸芽的葉基接種在MS＋3 mg/L 6-BA＋2 mg/L NAA培養(yǎng)基上，在誘導(dǎo)一個(gè)月后從切口處會(huì)產(chǎn)生結(jié)瘤狀愈傷組織，誘導(dǎo)率大約為60%。

b、不同培養(yǎng)時(shí)間愈傷組織鮮重質(zhì)量增加率結(jié)果表明，在進(jìn)行培養(yǎng)20天后，鮮重增加率可以達(dá)到最大值，之后會(huì)夏季，因此愈傷組織最佳繼代周期為20天。

c、將愈傷組織轉(zhuǎn)接于MS＋2.0 mg/L 6-BA＋1.0 mg/L NAA的分化培養(yǎng)基上，要求溫度在26度，光照在1500LX的條件下進(jìn)行培養(yǎng)，大約20天后部分愈傷組織的球形節(jié)狀表面就會(huì)出現(xiàn)小綠點(diǎn)，隨著小綠點(diǎn)的生長(zhǎng)發(fā)育會(huì)形成叢生芽。

d、將叢生芽切成單株轉(zhuǎn)移到分化培養(yǎng)基上進(jìn)行繼代培養(yǎng)，單株芽會(huì)慢慢長(zhǎng)到，等30天后會(huì)形成再生的植株，繼代周期為25-30天。

1.2.3 誘導(dǎo)生根

a、將獲得的組培苗切成單株轉(zhuǎn)接至培養(yǎng)基(MS＋2.0 mg/L 6-BA＋1.0 mg/L NAA)中，培養(yǎng)天數(shù)為25-30天，等不定芽長(zhǎng)至株高2cm、長(zhǎng)至3-5片葉時(shí)，將不定芽沿基部切下接到生根培養(yǎng)基上誘導(dǎo)生根，生根培養(yǎng)基為MS＋1.0 mg/LNAA＋0.5 mg/L IBA，培養(yǎng)的條件跟繼代培養(yǎng)大致相同。

b、在培養(yǎng)15天左右小苗基本就會(huì)長(zhǎng)根，等30天后會(huì)長(zhǎng)出10條左右較粗的根，生根率高達(dá)90%-100%。

1.2.4 練苗移栽

在移栽前練苗有利于提高組培苗的移栽成活率，具體操作為：當(dāng)小苗有3-5條1cm以上的不定根時(shí)逐漸開蓋練苗3-5天，取出小苗后將根部的培養(yǎng)基洗去晾干，移到透氣性及保濕性良好的泥炭土中澆定植水，同時(shí)保持土壤濕潤(rùn)，等遮蔭7-14天后就會(huì)長(zhǎng)出新的根和芽，移栽成活率高達(dá)95%。

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